应用RD-PCR技术构建溶藻弧菌的cDNA文库

• 作者: 吴灶和 王蓓 简纪常 鲁义善
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 溶藻弧菌 cDNA文库 限制性显示PCR
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 页码范围: 731-736
• 页数: 6页
• 分类号: S917
• 字数: 5190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2007.06.005

摘要

应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题.并进行筛选、收集cDNA片段进行测序,根据测序结果进行生物信息学分析和结果验证.实验结果表明,我们成功地构建了溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,获得一百多个基因片段并对其中53个基因片段进行测序分析,获得了如细菌Ⅲ型分泌系统易位蛋白、趋药性传感器、类丝氨酸蛋白酶等毒力相关因子的基因片断.并且在一定程度上证实了poly(A)化在细菌中不是个别和偶然的现象.实验结果说明了我们所构建的溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库质量高,文库基因片段的重复性低,筛选基因片段效率高、目的性强.本文并探讨了限制性显示PCR技术在细菌poly(A)化mRNA的cDNA1文库构建中的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴灶和	广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室	48	554	15.0	21.0
2	简纪常	广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室	59	314	8.0	16.0
3	王蓓	广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室	14	43	3.0	6.0