胆盐水解酶的分离纯化与部分特性研究

• 作者: 刘慧 张燕 李平兰 王延祥 王玉文
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 工学
• 关键词: 胆盐水解酶 分离 纯化 特性
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-41
• 页数: 7页
• 分类号: TS2
• 字数: 4983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2007.05.007

摘要

为了给胆盐水解酶结构分析及降低血液胆固醇的机理研究提供理论基础,采用硫酸铵分级沉淀、透析、阴离子交换树脂层析等方法对分离自我国传统开菲尔粒中的1株干酪乳杆菌KTx(lactobillus casei KTx)产生的胆盐水解酶进行了纯化,并对其部分特性进行了研究.结果表明:在70%的硫酸铵条件下酶蛋白能最大程度地沉淀.采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂层析,流速1.0 mL/min,用0.1 mol/L NaCl-50 mmol/L磷酸缓冲液(pH 6.5)洗脱,比活力可达到115(AU/mg),是原粗酶液的17倍.纯化后的样品经SDS-PAGE电泳,初步确定了胆盐水解酶的分子质量约30 kDa.该酶的最适反应温度35℃,最适pH 6.0,最适反应底物浓度6mmol/L,酶促反应动力学常数4.57 mmol/L.抑制剂对此酶的抑制作用强弱顺序依次为:尿素＞SDS＞EDTA.Al3+对此酶的激活能力最强,其次是Fe3+,Zn2+对酶活无激活作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘慧	北京农学院食品科学与工程系	69	844	19.0	26.0
2	李平兰	中国农业大学食品科学与营养工程学院	190	2380	26.0	39.0
3	张燕	中国农业大学食品科学与营养工程学院	59	642	13.0	24.0
4	王玉文	中国农业大学食品科学与营养工程学院	5	91	4.0	5.0
5	王延祥	中国农业大学食品科学与营养工程学院	9	121	5.0	9.0