柑桔溃疡病菌重组单链抗体的高效表达及活性检测

• 作者: 夏玉先 殷幼平 王中康 袁青 陈刚
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: XAC 表达 包涵体 单链抗体 复性 Biacore分析
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 1066-1069
• 页数: 4页
• 分类号: Q933
• 字数: 3544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.06.023

摘要

运用PCR方法扩增利用核糖体展示技术筛选的抗柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri, XAC)的单链抗体(ScFv 95)基因片段,将单链抗体基因重组到原核表达载体pET30a(+)中,构建单链抗体高效表达载体pET30a(+)-XAC-ScFv.再将pET30a(+)-XAC-ScFv质粒转化进大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达,并对表达产物进行纯化、复性及活性检测.获得了抗XAC单链抗体的高效表达蛋白,以包涵体形式存在的表达蛋白大小约32kDa.包涵体蛋白经过变性、纯化和复性后,初步获得有功能的单链抗体.同时用Biacore分析XAC-ScFv-95与XAC LPS作用,结果表明复性后的XAC-ScFv-95具有较高的亲和力,从而为柑桔溃疡病菌XAC的免疫诊断和防治研究提供了新的工具和途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈刚	重庆大学生物工程学院重庆市基因功能与调控重点实验室	113	1636	21.0	36.0
2	王中康	重庆大学生物工程学院重庆市基因功能与调控重点实验室	57	766	16.0	25.0
3	夏玉先	重庆大学生物工程学院重庆市基因功能与调控重点实验室	33	531	11.0	22.0
4	殷幼平	重庆大学生物工程学院重庆市基因功能与调控重点实验室	57	718	14.0	23.0
5	袁青	重庆大学生物工程学院重庆市基因功能与调控重点实验室	5	96	4.0	5.0