适用于4种玉米基因型的农杆菌转化方法的探讨

• 作者: 叶兴国 张世煌 梁业红
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 根癌农杆菌 玉米 基因型 遗传转化 瞬间表达 抗性愈伤组织
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 771-775
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0496-3490.2007.05.012

摘要

利用改良的农杆菌培养液、侵染液、共培养培养基和筛选培养基等技术体系,对4个玉米基因型Hi-Ⅱ、H99、国内2个优良自交系R18-599和齐319的新鲜幼胚、预培养幼胚、胚性愈伤组织进行了农杆菌转化研究,并比较了不同共培养方式对农杆菌侵染不同玉米组织的影响.结果表明,Hi-Ⅱ新鲜幼胚在固体培养基上共培养和滤纸上共培养后GUS基因瞬间表达率分别为83.7%和4.4%,前法优于后法;Hi-Ⅱ新鲜幼胚、预培养3 d的幼胚愈伤组织经农杆菌侵染后GUS基因瞬间表达率分别为83.7%和12.1%,新鲜幼胚比预培养的幼胚愈伤组织更适合于农杆菌转化.用上述优化的条件对另外3个不同基因型的2种不同外植体H99、齐319(新鲜幼胚)和R18-599(胚性愈伤组织)进行遗传转化,共培养3 d后的GUS基因瞬间表达率分别为65.2%、52.6%和58%,表明该转化体系适合于上述4种基因型的幼胚和胚性愈伤组织的遗传转化.此外农杆菌侵染Hi-Ⅱ新鲜幼胚后经在含巴龙霉素25～100 mg L-1培养基上3轮选择后,抗性愈伤组织获得率为2.4%,近似反映了本研究的遗传转化率.其他3个基因型的抗性愈伤也正在筛选中.结果初步表明,本研究建立的农杆菌介导的玉米遗传转化体系可能对4种基因型均适用.