ELISA检测土拨鼠肝炎病毒核心抗体方法的建立

• 作者: 杨东亮 江敏 王宝菊 田拥军 陆蒙吉 鲍俊杰
• 来源期刊: 肝脏
• 学科: 医学
• 关键词: 土拨鼠肝炎病毒核心抗体 ELISA 中国旱獭
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 183-185
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 3095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1704.2007.03.007

摘要

目的 建立检测土拨鼠肝炎病毒(WHV)核心抗体的ELISA方法,应用于WHV感染的中国旱獭动物模型的研究.方法 原核表达重组WHcAg,氯化铯密度梯度离心获得非变性的纯化蛋白;用该纯化蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体;建立竞争抑制ELISA方法用于检测旱獭血清中的抗-WHc.结果 纯化后的蛋白浓度达0.86 mg/mL,纯度达89.48%;免疫小鼠后获得抗血清,ELISA间接法显示其多克隆抗体效价达1:640 000,Western blot分析显示该抗体能特异识别WHcAg;建立的竞争抑制ELISA方法对旱獭血清中可能存在的抗-WHc进行检测,诊断特异性及敏感性均较好,重复测定的批内变异系数和批间变异系数均小于10%.结论 成功地建立检测旱獭血清中抗-WHc的竞争抑制ELISA方法.该方法具有稳定、简便、特异、敏感的特点,适用于大量旱獭血清抗-WHc的筛查工作,为进一步研究中国旱獭这一新型乙型肝炎病毒动物模型奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田拥军	华中科技大学附属同济医院临床免疫研究室	14	72	5.0	8.0
5	杨东亮	华中科技大学附属同济医院临床免疫研究室	127	582	14.0	17.0
6	王宝菊	华中科技大学附属同济医院临床免疫研究室	16	16	2.0	3.0
7	江敏	华中科技大学附属同济医院病原生物系	41	215	8.0	13.0
8	陆蒙吉	华中科技大学附属同济医院病原生物系	5	26	3.0	5.0
9	鲍俊杰	华中科技大学附属同济医院临床免疫研究室	1	2	1.0	1.0