氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及细胞外信号调节激酶信号转导机制的研究

• 作者: 匡凤梧 卢仲毅 方芳 王兴勇 蒋静 许峰 陈娟
• 来源期刊: 中国危重病急救医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 细胞凋亡 细胞外信号调节激酶 活性氧
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 193-196
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-0603.2007.04.001

摘要

目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ型细胞)修复存活、凋亡及其细胞外信号调节激酶(ERK)对凋亡的调控作用.方法 采用过氧化氢(H2O2)处理体外分离纯化培养的原代大鼠ATⅡ型细胞;用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测H2O2刺激后ATⅡ型细胞磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并观察ERK特异性抑制剂PD98059干预后细胞凋亡的变化.结果 与对照组比较,10 μmol/L和100 μmol/L的H2O2处理对ATⅡ型细胞存活率和凋亡率无明显影响;500 μmol/L和1 000 μmol/L的H2O2处理可导致ATⅡ型细胞的存活率明显降低,凋亡率显著升高(P均＜0.05),呈剂量依赖性.500 μmol/L H2O2处理ATⅡ型细胞30 min,细胞存活率和凋亡率均无显著变化;处理180 min细胞存活率明显降低,凋亡率明显增高(P均＜0.05),呈时间依赖性.500 μmol/L H2O2可刺激p-ERK1/2阳性表达,以刺激30 min表达最强;使用ERK抑制剂(PD98059)干预后,ATⅡ型细胞凋亡率明显增高.结论 H2O2可以剂量和时间依赖的方式诱导ATⅡ型细胞凋亡,ERK信号转导途径参与了ATⅡ型细胞的凋亡调控,对氧化应激状态下的ATⅡ型细胞可能起到保护作用.