应用禽呼肠孤病毒σ3融合蛋白为抗原的ELISA检测方法的建立

• 作者: DENG Xian-wen LIU Jia-bo PANG Yao-shan QIN Yü TANG Xiao-fei XIE Li-ji XIE Zhi-qin XIE Zhi-xun 刘加波 唐小飞 庞耀珊 秦宇 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 σ3融合蛋白 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 3-7
• 页数: 5页
• 分类号: S858.3
• 字数: 3938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-5130.2007.11.002

摘要

将表达的禽呼肠孤病毒(ARV)σ3融合蛋白纯化后作为抗原,建立了检测ARV抗体的间接ELISA方法,并对ELISA的反应条件进行了摸索,确定了抗原的最适包被浓度为3.98μg/mL,检测血清最适稀释倍数为1∶200,血清与抗原反应最佳反应时间为37℃作用2 h,酶标二抗最佳作用时间为37℃作用1 h,底物的最佳显色时间为25min.包被的抗原不与新城疫病毒、H5亚型禽流感病毒、传染性法氏囊病毒等阳性血清发生交叉反应.用该方法建立的ELISA诊断方法,具有很好的敏感性和特异性,为ARV的诊断和检测以及血清学调查提供良好的技术手段.