人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库的构建和初步筛选

• 作者: 刘红雨 周清华 朱大兴 朱文 李娟 闫惠琴 陈军 马力
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 转移相关基因 抑制消减杂交 斑点杂交
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 163-167
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2|Q785
• 字数: 3639字
• 语种: 中文

摘要

背景与目的 筛选肺癌转移相关基因有助于阐明肺癌侵袭转移的分子机理.为了筛选不同转移潜能肺癌的转移相关差异表达基因,本研究构建不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株NL9980和L9981间差异表达基因的消减cDNA文库,并对消减文库进行初步筛选.方法 应用抑制消减杂交技术构建人大细胞肺癌高低转移株NL9980与L9981间差异表达基因的正向消减cDNA文库和反向消减cDNA文库,利用α互补原理,经蓝白菌落初步筛选获得阳性克隆,应用斑点杂交的方法对正向和反向消减cDNA文库进行杂交筛选.结果 成功构建了人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因的正向消减cDNA文库和反向消减cDNA文库.经蓝白菌落筛选和斑点杂交,正向消减文库获得了307个阳性克隆,反向消减文库获得了78个阳性克隆.结论 抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,利用此方法可以成功构建人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库.不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株中存在可能与转移相关的差异表达基因.