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摘要:
目的:研究PRL-2基因对肝细胞增殖和细胞周期的影响.方法:采用脂质体转染的方法将重组质粒稳定转染至正常永生化肝细胞系CL1中,G418筛选阳性克隆.应用实时荧光定量聚合酶链反应、Western印迹和免疫组化分析PRL-2在阳性细胞的表达及蛋白定位,MTT法检测细胞的群体倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western印迹分析细胞周期素A、D1、E以及周期蛋白依赖激酶抑制因子p16、p21WAF1及p27Kip1的变化,实时荧光定量聚合酶链反应检测p21WAF1mRNA的变化.结果:成功构建PRL-2真核表达载体pcDNA3-PRL-2.脂质体转染细胞经过G418筛选后,获得稳定表达PRL-2的细胞亚系PRL-2-CL1.经实时荧光定量PCR、Western印迹和免疫组化证实,PRL-2-CL1细胞系PRL-2基因及蛋白表达水平高于对照组,流式细胞仪检测细胞周期S期细胞比例明显增高,MTT法检测细胞群体倍增时间缩短.Western印迹及实时荧光定量聚合酶链反应显示p21WAF1在转染后较对照组明显降低,细胞周期素A、D1、E及p16、p27Kip1无明显变化.结论:重组PRL-2真核表达载体构建正确,并在永生化肝细胞中获得稳定、高效表达.PRL-2基因具有促进细胞增殖的作用,这种作用与其降低p21WAF1蛋白含量相关.
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文献信息
篇名 PRL-2基因转染对肝细胞增殖及细胞周期的影响
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 肝细胞 蛋白质酪氨酸磷酸酶 真核表达载体 细胞周期
年,卷(期) 2007,(11) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 2229-2233
页数 5页 分类号 R392.11
字数 3623字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.11.033
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 钟佛添 42 191 8.0 11.0
2 罗红鹤 70 251 8.0 11.0
3 吴伟康 中山大学基础医学院病理生理教研室 154 2190 28.0 36.0
4 巫国勇 49 188 8.0 10.0
5 程超 36 144 6.0 9.0
6 郭爱林 广东省人民医院医学研究中心 27 105 5.0 9.0
7 马俊 25 100 5.0 8.0
8 何伟玲 8 26 2.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
肝细胞
蛋白质酪氨酸磷酸酶
真核表达载体
细胞周期
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
出版文献量(篇)
11461
总下载数(次)
3
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导