PRL-2基因转染对肝细胞增殖及细胞周期的影响

• 作者: 何伟玲 吴伟康 巫国勇 程超 罗红鹤 郭爱林 钟佛添 马俊
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞 蛋白质酪氨酸磷酸酶 真核表达载体 细胞周期
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2229-2233
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3623字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.11.033

摘要

目的:研究PRL-2基因对肝细胞增殖和细胞周期的影响.方法:采用脂质体转染的方法将重组质粒稳定转染至正常永生化肝细胞系CL1中,G418筛选阳性克隆.应用实时荧光定量聚合酶链反应、Western印迹和免疫组化分析PRL-2在阳性细胞的表达及蛋白定位,MTT法检测细胞的群体倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western印迹分析细胞周期素A、D1、E以及周期蛋白依赖激酶抑制因子p16、p21WAF1及p27Kip1的变化,实时荧光定量聚合酶链反应检测p21WAF1mRNA的变化.结果:成功构建PRL-2真核表达载体pcDNA3-PRL-2.脂质体转染细胞经过G418筛选后,获得稳定表达PRL-2的细胞亚系PRL-2-CL1.经实时荧光定量PCR、Western印迹和免疫组化证实,PRL-2-CL1细胞系PRL-2基因及蛋白表达水平高于对照组,流式细胞仪检测细胞周期S期细胞比例明显增高,MTT法检测细胞群体倍增时间缩短.Western印迹及实时荧光定量聚合酶链反应显示p21WAF1在转染后较对照组明显降低,细胞周期素A、D1、E及p16、p27Kip1无明显变化.结论:重组PRL-2真核表达载体构建正确,并在永生化肝细胞中获得稳定、高效表达.PRL-2基因具有促进细胞增殖的作用,这种作用与其降低p21WAF1蛋白含量相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟佛添		42	191	8.0	11.0
2	罗红鹤		70	251	8.0	11.0
3	吴伟康	中山大学基础医学院病理生理教研室	154	2190	28.0	36.0
4	巫国勇		49	188	8.0	10.0
5	程超		36	144	6.0	9.0
6	郭爱林	广东省人民医院医学研究中心	27	105	5.0	9.0
7	马俊		25	100	5.0	8.0
8	何伟玲		8	26	2.0	5.0