乳腺特异高表达人促红细胞生成素转基因奶山羊的制备

• 作者: 刘思国 吴友兵 张爱民 徐旭俊 成国祥 沙红英 陈娟 陈建泉
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hEPO 奶山羊,乳腺表达,原核注射
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 439-443
• 页数: 5页
• 分类号: R-33
• 字数: 4324字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2007.08.002

摘要

目的 制备乳腺特异性高表达人促红细胞生成素(hEPO)转基因奶山羊.方法 采用牛β-乳球蛋白基因(BLG)调控元件和hEPO全长编码序列基因组DNA构建真核表达载体,应用受精卵原核注射的方法制备hEPO转基因山羊.结果 在原核注射获得的188头羔羊中,经Southern blot法检测有4头羊含有hEPO基因,其中3头为母羊,1头公羊于出生后20 d死亡;3头转基因母羊hEPO基因的拷贝数分别为1、10、2;Western blot检测结果显示转基因羊乳中的hEPO分子质量为32 kDa;MTT法检测结果表明,在泌乳10 d的3只转基因羊乳汁中,每毫升乳汁中hEPO活性分别达到1.17×102 IU、1.90×104 IU、1.91×104 IU.结论 牛BLG能够调控hEPO基因在山羊乳腺中高表达,为实现其他药用蛋白在山羊乳腺中表达奠定了基础.