人类U5·116 ku蛋白基因片段的克隆

• 作者: 史雪彬 姚智 杨洁 洪敬欣 邵洁
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: HeLa细胞 基因表达 遗传载体 质粒 克隆,分子 逆转录聚合酶链反应 人 U5·116 ku蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 401-404
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2007.06.001

摘要

目的:构建人类U5·116 ku基因全长真核表达质粒.方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,一步法合成单链cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人类U5·116 ku基因两段连续的序列,首先分别克隆至pTZ57R/T载体,两段序列连接成全长后再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒.结果:RT-PCR法获得U5·116 ku基因两段连续的序列,长度分别为1 672 bp和1 246 bp,分别与pTZ57R/T载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(-)真核表达载体进行连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒构建成功.结论:成功克隆了人类U5·116 ku的编码基因,并构建了其真核表达质粒pcDNA3.1(-)-U5·116 ku.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚智	天津医科大学免疫学教研室	137	1428	20.0	33.0
2	杨洁	天津医科大学免疫学教研室	56	151	7.0	10.0
3	邵洁	天津医科大学免疫学教研室	6	12	2.0	3.0
4	洪敬欣	天津医科大学免疫学教研室	4	4	1.0	1.0
5	史雪彬	天津医科大学免疫学教研室	6	4	1.0	1.0