基于AFLP分析用吴茱萸叶高质量DNA的提取

• 作者: 冉贵萍 刘杨 谭杰峰 黄海
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 吴茱萸 基因组DNA 提取 改良CTAB法 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 38-40
• 页数: 3页
• 分类号: R282.7
• 字数: 4859字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.05.013

摘要

目的:研究吴茱萸叶基因组DNA的提取方法,以用于扩增片段长度多态性(AFLP)分析.方法:设计了一种改良CTAB法:以石英砂代替液氮研磨;抽提前用不溶性PVP结合酚形成络合物,然后用缓冲液除去;抽提中加入Vc.将改良CTAB法所提吴茱萸叶DNA与传统的SDS法、CTAB法所提DNA进行比较.利用植物的核糖体DNA(rDNA)保守序列设计引物行PCR扩增鉴定吴茱萸DNA及其质量.并确定提取方法中最佳样本含量和β-巯基乙醇浓度.结果:改良CTAB法提取石虎、疏毛吴茱萸总DNA呈白色,A260/A280为1.721～1.886,DNA分子完整,约20kb左右,PCR扩增条带清晰、明亮,无杂带和脱尾.并确定0.10g为最佳样本量,2.0%为最佳β-ME浓度.结论:石英砂研磨简便、迅速、均匀,该实验所建立的改良CTAB法可有效避免次生代谢物的氧化褐变,是一种小量、快速提取吴茱萸叶DNA优化方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄海	贵阳医学院检验系临床生化教研室	32	125	7.0	8.0
2	冉贵萍	贵阳医学院检验系临床生化教研室	10	32	4.0	5.0
3	刘杨	贵阳医学院检验系临床生化教研室	7	31	4.0	5.0
4	谭杰峰	贵阳医学院检验系临床生化教研室	1	4	1.0	1.0