腐败梭菌α毒素基因的克隆表达及其类毒素的免疫原性研究

• 作者: 张燕 赵宝华 边艳青
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 农学
• 关键词: α毒素 类毒素 免疫原性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 67-72
• 页数: 6页
• 分类号: S858.317
• 字数: 5767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2007.01.011

摘要

根据GenBank公布的腐败梭菌α毒素基因序列,设计了一对引物,并以腐败梭菌基因组为模板,经PCR特异性扩增出腐败梭菌菌株HeB01的α毒素基因.序列分析表明,该基因产物大小为1323bp,与GenBank报道的4个腐败梭菌参考菌株α毒素基因序列同源性高于99.5%.将扩增的α毒素基因定向克隆到原核表达载体pQE30中,得到重组质粒pQE30-α,将重组质粒转化大肠杆菌M15中,得到重组菌株M15(pQE30-α),经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析可见表达的48 kD特异条带;Western blot和ELISA检测实验表明:表达的α毒素与抗天然α毒素抗体发生特异性反应,说明α毒素蛋白具有较好的免疫原性.将表达的α毒素蛋白制成类毒素疫苗,免疫小鼠后,具有一定的保护能力,表明该重组菌株有望作为腐败梭菌基因工程类毒素疫苗的候选生产菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宝华	河北师范大学生命科学学院	238	1801	20.0	28.0
2	边艳青	河北师范大学生命科学学院	28	341	11.0	18.0