放射诱导的一氧化氮同步放大基因电路的构建及鉴定

• 作者: 康保国 王卫东 陈正堂
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 放射基因治疗 基因电路 一氧化氮
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究生专栏
• 页码范围: 88-92
• 页数: 5页
• 分类号: R743.2|Q78
• 字数: 3798字
• 语种: 中文

摘要

背景与目的 正反馈基因电路(gene circuits)对基因表达有放大作用,目的基因在细胞内的同步化表达可进一步增强基因治疗效果.本研究旨在构建由放射诱导的一氧化氮(nitric oxide,NO)同步放大基因电路,以探索提高目的基因表达水平、延长表达时间的新途径,从而进一步完善肿瘤放射基因治疗模式.方法 将具有放射诱导性的c-fos启动子与诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)串联,构建c-fos启动子驱动的iNOS和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)双顺反子表达载体pfosiNOS/GFP用脂质体介导该载体转染肺腺癌A549细胞,予以一定剂量照射,观察照射后不同时相点细胞荧光强度,检测iNOS蛋白表达水平.结果 转染载体pfos-iNOS/GFP的细胞照射后细胞荧光强度、iNOS表达水平均较对照组明显增加,其中以照射后16 h增加最为明显.结论 成功构建了放射诱导的NO同步放大基因电路,大大提高了放射诱导的目的基因的表达水平,为进一步提高肿瘤放射基因治疗的疗效奠定了理论基础.