兔自体骨髓间充质干细胞移植治疗角膜内皮损伤的研究

• 作者: 刘小伟 赵家良
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜疾病 内皮,角膜 间质干细胞移植 兔
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 540-545
• 页数: 6页
• 分类号: R77
• 字数: 5894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4081.2007.06.013

摘要

目的 研究自体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植到兔角膜内皮细胞(CECs)部位后的形态和功能分化.方法 体外培养新西兰兔自体MSCs并用5-溴尿嘧啶脱氧核苷(Brdu)标记后接种在明胶载体膜上;利用α-氰基丙烯酸脘基酯作为组织黏合剂,将接种有兔自体MSCs的载体与机械去除了内皮细胞的自体兔角膜植片相黏合,原位缝合进行MSCs移植;对照分别移植体外培养的同种异体CECs和空白载体膜.59只新西兰白兔接受了移植实验,其中21只新西兰兔的右眼接受了自体MSCs移植,21只兔的右眼接受了CECs移植,另外17只兔的右眼移植了空白载体.术后不同时间观察兔眼角膜移植片的透明情况、角膜厚度及眼压,并利用共焦显微镜进行移植细胞的形态观察和精确计数.术后观察12周,取角膜标本分别进行组织切片、抗Brdu单克隆抗体免疫组织化学染色和电镜观察.结果 MSCs和CECs在明胶载体膜上生长良好,体外培养3～5 d后细胞汇合,细胞密度可达约MSCs 3000 个/mm2、CECs 2700个/mm2.术后2周,57只植片均发生了水肿,并逐渐混浊.自体MSCs移植组术后8周植片水肿逐渐减轻,角膜透明度恢复;CECs移植组植片术后约4周水肿减退;而对照组角膜植片则持续水肿、混浊.术后12周时,移植细胞的平均密度为:MSCs组(2105±677)个/mm2、CECs组(2023±330)个/mm2.扫描电镜显示MSCs移植后逐渐分化成为类似多角形的细胞,但是细胞间的间隙较大,细胞表面有丰富的微绒毛.Brdu单克隆抗体免疫组织化学染色可将移植的细胞核着色.结论 自体MSCs细胞替代CECs进行移植后,这些细胞在角膜内表面可以分化成为一种类似CECs形态和功能的细胞.