人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞中肿瘤干细胞的分离纯化

• 作者: 刘斌 彭展 李永平
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脉络膜肿瘤 干细胞/病理学 肿瘤干细胞/细胞学
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 干细胞研究
• 页码范围: 87-90
• 页数: 4页
• 分类号: R773.4|R73-35
• 字数: 3902字
• 语种: 中文

摘要

目的 分离及纯化人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1中的肿瘤干细胞.方法 将OCM-1细胞复苏,使用Dubecco标准改良Eagle培养基(DMEM/F12)培养后,改用无血清化学限定培养基(SFM),并分离纯化培养肿瘤干细胞,用流式细胞仪检测神经干细胞特异性标记物CD133的表达比率,并对第六代细胞进行神经RNA结合蛋白(musashi-1)免疫细胞化学染色,显微镜下观察阳性细胞比率.结果 在标准DMEM/F12培养基中贴壁生长的OCM-1细胞用SFM培养基培养后,贴壁细胞显著减少,至第6代时细胞均为悬浮团状集落生长,呈现典型的干细胞生长方式.在不同代的细胞中,CD133均有阳性,未经过分离的OCM-1细胞、经过SFM培养并分离的第1、2代OCM-1细胞的阳性比率分别是2.5%、21.7%、57.8%,第6代的细胞CD133阳性比率达到79.8%,musashi-1强阳性表达.结论 脉络膜黑色素瘤细胞中存在肿瘤干细胞.使用干细胞培养液培养,并通过限制分化、连续传代的方法,可分离纯化出悬浮克隆集落生长的干细胞.