E2F-1基因真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株MKN-45增殖的影响

• 作者: 宫志伟 李雷 王长青 肖强 谢玉波 谭宁
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 MKN-45细胞 E2F-1 转染 增殖
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1064-1068
• 页数: 5页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467x.2007.10.005

摘要

背景与目的:E2F-1基因在多种肿瘤细胞中过表达,并表现出抑制或促进肿瘤细胞增殖的不同特性.本研究通过构建E2F-1基因真核表达载体.分析E2F-1过表达对胃腺癌细胞株MKN-45的影响.方法:巢式聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增E2F-1基因片段,用pCMV-HA载体构建真核重组质粒,转染MKN-45细胞(转染COS-7细胞用以鉴定所构建的载体).Western blot检测转染情况.并通过克隆形成实验、MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期,观察E2F-1过表达对MKN-45细胞的影响.结果:pCMV-E2F1-HA重组质粒成功转染MKN-45细胞.转染pCMV-E2F1-HA的MKN-45细胞形成的克隆数为4.7±1.8,明显少于转染空载体组的30.2+6.7(P＜0.01).转染pCMV-E2F1-HA的MKN-45细胞增殖随时间而减慢,第5、6、7天的细胞增殖率分别为73.5%、63.5%和56.1%,明显低于转染空载体组(P＜0.01).与转染空载体组相比,表达E2F-1基因的MKN-45细胞在G0/G1期所占比例明显提高(71.4% vs.59.7%,P＜0.05),S期所占比例明显下降(18.7% vs.30.7%,P＜0.05).结论:成功构建E2F-1基因真核表达载体,E2F-1过表达可抑制MKN-45细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雷	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	27	95	6.0	7.0
2	谢玉波	广西医科大学第一附属医院麻醉科	154	576	10.0	13.0
3	肖强	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	104	361	9.0	11.0
4	王长青	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	13	43	4.0	6.0
5	谭宁	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	17	84	5.0	8.0
6	宫志伟	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	1	7	1.0	1.0