糖蛋白结构质谱解析的样品前处理

• 作者: 刘晓慧 周新文 周玮 杨芃原 申华莉
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 糖蛋白结构 质谱解析 样品前处理 条件优化
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 样品预处理方法专栏
• 页码范围: 623-627
• 页数: 5页
• 分类号: O658
• 字数: 3973字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2007.05.004

摘要

基于高分辨率、高精度、高灵敏度及良好表现力的多级质谱,以标准糖蛋白辣根过氧化物酶(HRP)、核糖核酸酶B(RNase B)为对象,探索了糖蛋白质谱分析前样品处理的技术流程.通过对糖蛋白样品前处理的各个步骤(包括蛋白变性方法(RNase B适合化学变性,HRP适合热变性)、酶的选择及条件(RNase B适用内蛋白酶Lys-C酶解,HRP适用胰蛋白酶酶解,酶解时间控制在12～16 h)、提肽液的组成(对于低丰度糖蛋白用50%乙腈-5%三氟乙酸提取)、基质的组成、点样方法("三明治"式))进行了优化,形成了简单易行、无需糖肽富集标记的糖蛋白溶液酶解-质谱分析和胶上分离酶解-质谱分析的技术路线,为实际样品体系中糖蛋白的结构解析提供了可行的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨芃原	复旦大学生物医学研究院	114	952	18.0	27.0
2	周新文	复旦大学生物医学研究院	7	27	4.0	5.0
3	刘晓慧	复旦大学生物医学研究院	6	26	3.0	5.0
4	申华莉	复旦大学生物医学研究院	10	68	3.0	8.0
5	周玮	复旦大学生物医学研究院	1	9	1.0	1.0