转人B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测

• 作者: 何家才 周健 唐爱发 李宝金 杨宏宇 王元银 邹多宏 郝艳红 阎旭
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: B淋巴细胞/免疫学 癌,鳞状细胞 细胞系
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 279-282
• 页数: 4页
• 分类号: R739.8|R730.261|R331.125|R392.1|R730.3
• 字数: 4188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2007.03.014

摘要

目的 探讨转入B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测.方法 采用脂质体介导法将已建好的真核表达质粒pEGFP-C1-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113中(Tca8113/B7-H3), RT-PCR检测B7-H3在该细胞中的表达,Western blot检测其蛋白的表达.经G418筛选后,用有限稀释法建立稳定高表达的带有B7-H3基因的Tca8113鳞癌细胞株.结果 RT-PCR方法检测到目的基因B7-H3的一个215 bp大小的cDNA扩增产物;DAB显色,裂解的Tca8113/B7-H3基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约65～86 ku大小的特异性条带.转染B7-H3的Tca8113细胞,经过细胞传代培养后仍然能够检测到高表达的B7-H3基因,经过有限稀释法建立了Tca8113/B7-H3细胞株.结论 成功建立了Tca8113/B7-H3细胞株,为以后的体内外试验提供了很好的平台,为近一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础.