家蝇抗菌肽基因Cecropin在COS-7细胞中的表达及产物活性初步研究

• 作者: 刘雷山 朱家勇 金小宝 马艳
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 天蚕素 真核表达 转染 杀菌活性
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 566-568
• 页数: 3页
• 分类号: R384
• 字数: 2071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.06.012

摘要

目的 初步研究家蝇抗菌肽Cecropin cDNA在非洲绿猴肾细胞株COS-7中的表达及其产物的抗菌作用.方法 以Cecropin基因为模板设计2条特异引物,扩增在C端含6×His标签的Cecropin开放阅读框序列,将此序列与真核表达载体pcDNA3.1(+)进行重组,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/Cecropin-His_6.以脂质体Lipofectamine TM 2 000为载体,对COS-7细胞进行重组质粒pcDNA3.1(+)/Cecropin-His_6和空载体pcDNA3.1(+)的转染,72 h后收集细胞培养上清液,表达产物经His-Trap HP亲合层析柱分离纯化和Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定后,进行杀菌活性的初步检测.结果 转染了重组质粒pcDNA3.1(+)/Cecropin-His_6细胞培养上清液的纯化物,行Tricine-SDS-PAGE电泳得到与预期分子量大小相符的单一目的条带,该纯化物对大肠杆菌E.coli K12D31具有一定的杀菌活性.结论 家蝇抗菌肽Cecropin cDNA在COS-7中得到了正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱家勇	广东药学院基础学院寄生虫学教研室	121	797	13.0	22.0
2	金小宝	广东药学院基础学院寄生虫学教研室	100	490	12.0	15.0
3	马艳	广东药学院基础学院寄生虫学教研室	20	105	6.0	9.0
4	刘雷山	广东药学院基础学院寄生虫学教研室	9	82	6.0	9.0