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摘要:
目的:利用Tet-on 基因表达调控系统建立由强力霉素(Dox)诱导TAp63γ基因表达的EC9706细胞系,为进一步研究TAp63γ基因的功能奠定基础.方法:将调控质粒pTet-on 转入EC9706细胞,经G418筛选后的细胞再次转染反应质粒pTRE-TAp63γ-HA,再用潮霉素筛选出阳性细胞克隆,RT-PCR法选择对Dox敏感的细胞克隆.最后用不同浓度Dox诱导,Western blot法确定Dox的最佳诱导浓度.采用此浓度的Dox分别诱导EC9706、EC9706/Tet/pTRE、EC9706/Tet/pTRE-TAp63γ 3组细胞,细胞增殖分析试剂盒(CCK-8试剂盒)检测细胞生长抑制率.结果:Dox浓度为3 mg/L时可诱导TAp63γ基因高表达,EC9706/Tet/pTRE-TAp63γ细胞的生长抑制率均高于EC9706和EC9706/Tet/pTRE细胞(P<0.05或0.01).结论:成功构建了Tet-on 调控TAp63γ基因表达的EC9706 细胞系,为进一步研究食管鳞癌细胞内P63蛋白的生物学行为提供了一个理想的研究平台.TAp63γ基因表达可使EC9706细胞增殖受到抑制.
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文献信息
篇名 Tet-on调控TAp63γ基因表达EC9706细胞系的建立及对细胞增殖的影响
来源期刊 郑州大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 Tet-on 基因表达系统 TAp63γ基因 食管癌 EC9706细胞
年,卷(期) 2007,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 286-289
页数 4页 分类号 R3
字数 2988字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-6825.2007.02.032
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 侯桂琴 郑州大学细胞生物学研究室 45 257 9.0 13.0
2 杨静 郑州大学医学科学研究所 91 325 11.0 14.0
3 许培荣 郑州大学细胞生物学研究室 40 265 11.0 15.0
4 范天黎 郑州大学医学科学研究所 36 117 6.0 10.0
5 袁保梅 郑州大学生物工程系 30 211 8.0 13.0
6 杨观瑞 郑州大学医学科学研究所 12 61 4.0 7.0
7 刘兰琦 郑州大学细胞生物学研究室 4 15 2.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
Tet-on
基因表达系统
TAp63γ基因
食管癌
EC9706细胞
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双月刊
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41-1340/R
大16开
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36-111
1957
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