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摘要:
目的 培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞,并应用检测ABP mRNA原位杂交方法加以鉴定.方法 选用18~22d龄SD雄性大鼠睾丸,采用0.25%胰蛋白酶、0.1%透明质酸酶、 0.1%胶原酶三酶依次消化法分离支持细胞,置于32℃ 5% CO2的培养箱培养,48h后用20mmol/L Tris-HCl低渗处理培养细胞.培养1周后应用伊红染色、吖啶橙荧光染色、Feulgen染色对所培养的支持细胞进行鉴定,同时应用原位杂交检测ABP mRNA方法鉴定分离培养的支持细胞.结果 培养1周后所获培养的支持细胞纯度达95%以上.分离培养的支持细胞ABP mRNA表达阳性,其形态结构特征与用其他方法鉴定为支持细胞的形态结构特征一致.结论 采用三酶连续消化及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高,而且应用原位杂交方法检测ABP mRNA是一种新的、特异、有效的鉴定支持细胞及其功能的方法.
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文献信息
篇名 大鼠睾丸支持细胞的分离、纯化和鉴定
来源期刊 解剖学报 学科 生物学
关键词 分离 鉴定 支持细胞 原位杂交 大鼠
年,卷(期) 2007,(2) 所属期刊栏目 新技术方法
研究方向 页码范围 246-249
页数 4页 分类号 Q813.1
字数 3669字 语种 英文
DOI 10.3321/j.issn:0529-1356.2007.02.027
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