利用线粒体膜电位测定筛选参与细胞凋亡的人类新基因

• 作者: 于鹏 张晨颖 王兰 石太平 邓唯唯 郝钰 陆阳 骆叶 高霞
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: 高通量筛选 细胞凋亡 线粒体膜电位 荧光 新基因
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 732-737
• 页数: 6页
• 分类号: Q987|R34
• 字数: 4680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2007.07.010

摘要

细胞凋亡(apoptosis)属于细胞程序化死亡(programmed cell death),是细胞内涉及到许多生化反应的复杂过程.建立了基于细胞水平的凋亡筛选模型,用于筛选人类基因组中功能未知的序列,以发现与细胞凋亡相关的新基因.通过构建人类未知基因的表达文库,并将未知基因表达载体瞬时转染HeLa细胞,用阳离子染料JC-1标记HeLa细胞线粒体内膜并检测线粒体跨膜电位,用流式细胞术进行阳性结果的验证.经过对未知基因表达文库内600个新基因的筛选,得到7个线粒体跨膜电位下降相关新基因(CHMP6、CGI-38、hCAP-H2、NUDT16L1、ARMC1、PHF17和FLJ21103),经实验验证,其中3个基因(CHMP6、CGI-38和hCAP-H2)与细胞凋亡相关.结果表明,所建立的基于细胞的凋亡筛选模型稳定高效,3个细胞凋亡相关基因将被进行深入研究.