重组阴道毛滴虫黏附蛋白33单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 俞石芳 李强 梁韶辉 潘长旺 谭峰 郑晓云 黄慧聪
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 阴道毛滴虫 AP33 单克隆抗体 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 282-285
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3574字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.03.019

摘要

目的 制备重组阴道毛滴虫(T.v)黏附蛋白33(AP33)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定.方法 将pET32(a)-AP33重组质粒转化大肠埃希菌(E. Coli)BL21(DE3),用0.5 mmol/L IPTG诱导表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过Ni-NTA法纯化,以纯化的融合蛋白33为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出分泌高滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,免疫印迹分析其特异性.结果 共筛选出能稳定分泌抗AP33单克隆抗体的5株(4A2,4F11,4F8,4E7,4H11)杂交瘤细胞株,抗体重链均为IgG1;腹水的上清效价为1∶40 000-1∶80 000.免疫印迹分析显示,5株单抗均能与重组阴道毛滴虫AP33发生特异性结合;与阴道毛滴虫抗原分子量为33kDa抗原分子结合.结论 制备的抗重组AP33杂交瘤细胞株能分泌识别重组AP33的高特异性单抗,为进一步研究其在阴道毛滴虫病免疫诊断中的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑晓云		22	75	6.0	8.0
2	潘长旺		64	412	11.0	17.0
3	俞石芳		12	14	2.0	3.0
4	黄慧聪		41	198	10.0	12.0
5	谭峰		38	128	7.0	9.0
6	梁韶辉		5	33	3.0	5.0
7	李强		13	85	4.0	9.0