丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 付慧 张丽莉 成凡 曹美茹 楚雍烈 王勇健 茹小荣
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 丙型肝炎病毒 ns5a基因 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 376-379,398
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2007.04.007

摘要

目的 克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因.方法 运用原核细胞基因工程技术.设计目的 基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的 片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再亚克隆到原核表达载体pET-28a中;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达;采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平.结果 成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体,并得以表达.结论 成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楚雍烈	西安交通大学医学院病原生物学教研室	76	311	10.0	13.0
2	付慧	西安医学院生物化学教研室	9	11	2.0	3.0
3	成凡	西安医学院生物化学教研室	12	25	3.0	4.0
4	张丽莉	西安医学院生物化学教研室	4	11	2.0	3.0
5	曹美茹	西安医学院生物化学教研室	4	13	2.0	3.0
6	茹小荣	西安医学院生物化学教研室	2	1	1.0	1.0
7	王勇健	西安医学院生物化学教研室	14	11	1.0	3.0