猪瘟病毒表面抗原E2基因植物表达载体的构建

• 作者: 李余良 李国强 樊福好 祁喜涛 胡建广 赵文亮
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 载体构建 猪瘟 种子特异表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2976字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.05.007

摘要

目的:克隆猪瘟病毒表面抗原E2基因,构建种子特异表达的载体,为在玉米种子内专一表达E2蛋白奠定基础.方法:终止序列NOS经中间载体pUC18插入植物表达载体pCAMBIA-1300的XbaⅠ与EcoRⅠ位点间,得重组质粒pCAMBIA-1300-NOS,命名为pCAMBIA-1300-NOS-bar;将1.4kb的种子特异表达启动子Globulin-1插入质粒pCR(R)2.1的Hind Ⅲ与BamH Ⅰ位点间,得重组质粒pCR-G;将1.1kb的E2基因插入质粒pBluescriptSK Ⅱ的Hind Ⅲ与BamH Ⅰ位点间,消除HindⅢ位点,得重组质粒pBluescriptSK Ⅱ-E2;用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ从pBluescriptSK Ⅱ-E2中分离E2,插入pCR-G的amH Ⅰ和Xho Ⅰ之间,得重组质粒pCR-G-E2;用HindⅢ和XbaⅠ从pCR-G-E2中分离2.5kb的片断,插入载体pCAMBIA-1300-NOS-bar中,得玉米种子特异表达载体pCAMBIA-1300-GEN.结果:对重组质粒pCAMBIA-1300-GEN经酶切、测序鉴定正确无误.结论:成功构建了种子特异表达载体并将其导入根癌农杆菌LBA4404,为在种子内特异表达猪瘟主要抗原蛋白的转基因植物新品种奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊福好		91	103	6.0	8.0
2	胡建广		81	754	14.0	25.0
3	李余良		51	454	10.0	20.0
4	祁喜涛		13	30	3.0	5.0
5	李国强		2	2	1.0	1.0
6	赵文亮		1	1	1.0	1.0