HEV ORF3真核表达载体的构建、鉴定和真核表达

• 作者: 田德英 贾柳萍 陈焰 黄腊平
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒 病毒融合蛋白质 真核表达 凋亡 增殖
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 985-987
• 页数: 3页
• 分类号: R373.2
• 字数: 2755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.10.008

摘要

目的 构建表达戊型肝炎病毒(HEV)ORF3-pXF2RH融合蛋白的真核表达载体;获得重组质粒稳定转染的L02细胞系.方法 利用PCR技术从HEV基因组中扩增出ORF3基因片断,Hind Ⅲ/EcolⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pXF2RH真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒ORF3-pXF2RH.将阳性克隆用脂质体法转染L02细胞系,G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定ORF3-pXF2RH融合蛋白的表达.结果 真核表达质粒转染L02细胞,SDS-PAGE显示在28.5kD左右蛋白表达量明显高于对照组,Western blot在28.5kD左右有一条强的棕色条带.结论 成功构建ORF3-pXF2RH真核表达质粒,在L02细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田德英	华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科	183	935	14.0	20.0
2	黄腊平	华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科	4	5	1.0	2.0
3	贾柳萍	南方医科大学附属南海医院消化内科	21	111	7.0	9.0
4	陈焰	南方医科大学附属南海医院消化内科	13	42	4.0	6.0