氩离子注入介导麻黄基因组DNA转化获得产麻黄碱重组酵母菌

• 作者: 凌海秋 娄恺 杨红梅 柯涛 武宝山 毛培宏 金湘 马向东
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 物理学
• 关键词: 氩离子注入 介导 麻黄基因组DNA 重组酵母 麻黄碱
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 新方法
• 页码范围: 905-909
• 页数: 5页
• 分类号: O539|Q939
• 字数: 4706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.05.030

摘要

通过氩离子(Ar+)nula anomala)中随机转化,转化后的注入介导蓝麻黄基因组DNA在异常汉逊酵母(Hansenula anomala)中随机转化,转化后的酵母菌经BTB指示性辅助筛选、斜面传代、液体培养、铜铬盐定性检识和RP-HPLC定量检测,获得了遗传稳定的以葡萄糖为碳源、NaNO3为氮源生物合成麻黄碱和(或)伪麻黄碱的重组酵母菌3株.液体培养72h,RP-HPLC测试胞外麻黄碱和伪麻黄碱的最高产量分别为11.87mg/L和4.11mg/L;胞内伪麻黄碱最高含量为294.86mg/g干细胞,胞内麻黄碱未检出.分析了Ar+注入介导蓝麻黄基因组DNA在酵母菌中的遗传转化效率,探讨了麻黄基因组DNA大分子的完整性对其在酵母菌中遗传转化的影响.