异源四倍体鲫鲤Sox4基因部分序列及其5'端调控区启动子片段的克隆与分析

• 作者: 刘季芳 刘少军 刘筠 李伟 陶敏 龙昱
• 来源期刊: 自然科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: Sox4 动子 GFP(增强绿色荧光蛋白) 5'端调控区
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 学术论文
• 页码范围: 1174-1180
• 页数: 7页
• 分类号: S9
• 字数: 3817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-008x.2007.09.003

摘要

通过PCR技术从异源四倍体鲫鲤基因组DNA中分离到Sox4基因部分基序.序列分析表明,其5'端调控区具有多种启动子所特有的序列元件,如TATA框,CAAT框等,据此推测,它具有启动子活性.采用高保真PCR方法克隆了异源四倍体鱼Sox4基因5'端调控区600 bp启动子片段,将其插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建重组载体pAtsox4EGFP-1.通过瞬时转染HeLa细胞,在倒置荧光显微镜下可检测到绿色荧光.结果表明,克隆的Atsox4基因5'端调控区具有启动子活性,并成功构建了含四倍体鱼Sox4基因启动子片段的报告基因载体,为以后研究Sox4基因表达调控的分子机制奠定了基础.