骨髓间充质干细胞培养并向骨骼肌诱导分化的实验研究

• 作者: 冯震 孙占胜 张云峰 智伟 李连新 杨志明 王伯珉 王杨 王永会 王珍 穆卫东 邓力 陈振强
• 来源期刊: 中华创伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 氮丙啶类 细胞,骨骼肌 细胞分化
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 609-613
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-8050.2007.08.016

摘要

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的定向分化及其在体内的形态发育情况. 方法 Wistar大鼠24只,向其左胫前肌处注射0.2 ml无水乙醇,致其无菌坏死,右胫前肌注射等渗盐水0.2 ml作为对照,制成动物模型后备用;取大鼠第3代BMSCs,5-氮杂胞苷、成肌调节因子(MyoD)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)联合进行诱导分化.诱导后第9天,收集BMSCs,用BrdU标记并诱导后注射到大鼠双下肢胫前肌处,分别在3,6,9和12 d取材进行形态观察和免疫组织化学检查. 结果 注射诱导后3 d, 实验组的成活率明显高于注射单纯注射BMSCs的对照组,BrdU标记细胞向骨骼肌分化,结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白均为弱阳性表达,6,9 d可见BrdU标记细胞向骨骼肌分化, 结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白阳性表达,第9天更为明显,注射后12 d后可见新生骨骼肌细胞形成肌小管,细胞核结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白强阳性表达. 结论 大鼠损伤肌肉的微环境中,BMSCs可向骨骼肌定向分化,并伴有结蛋白和骨骼肌肌球蛋白阳性表达;定向诱导后BMSCs在体内成活率高,增殖速率快,向骨骼肌分化纯度更高.