人巨细胞病毒蚀斑实验条件的优化及在抗病毒物质活性测定中的应用

• 作者: 张俊玲 王明丽
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 巨细胞病毒/分离和提纯
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 485-489
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9|R446
• 字数: 5110字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2007.05.003

摘要

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)的蚀斑形成实验最适工作条件,建立稳定易行的HCMV蚀斑技术,用于HCMV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究.方法 HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞(HF)单层,37℃吸附1 h,分别用含0.463‰、0.925‰ NaHCO3及0.5%、1%DMSO琼脂糖覆盖,1周后加盖第2层;2周后用0.5%结晶紫染色5 min,计数、计算pfu/ml,采用PCR法对蚀斑培养物进行鉴定;分别用患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清进行蚀斑抑制实验,计算中和抗体滴度;蚀斑减少实验测定不同浓度更昔洛韦(GCV)的抗HCMV活性.结果 HCMV对照孔在5 d出斑,蚀斑为圆形、实心、不透明状;两种浓度NaHCO3,对蚀斑形成数量、大小有明显影响且病毒滴度差异有显著性(P＜0.05).在含0.463‰ NaHCO3培养孔内,出斑时间提前至3 d;但不同浓度的DMSO对蚀斑数量、大小以及病毒滴度的影响差异无显著性(P＞0.05).HCMV患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清均可以抑制蚀斑形成.利用蚀斑减少实验测定GCV抗HCMV活性,可在7d内获得结果.结论 HCMV蚀斑形成实验条件经优化后,可以方便稳定地对HCMV进行定量测定以及抗病毒活性物质的筛选和评价.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王明丽	安徽医科大学微生物学教研室	174	907	13.0	19.0
2	张俊玲	安徽医科大学微生物学教研室	4	19	2.0	4.0