含蛋白质转导域的Ngb融合蛋白的原核表达、纯化及其生物学活性的初步研究

• 作者: 周国钰 周盛年 朱灿胜 楼之茵 胡学强
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白质转导 脑红蛋白 蛋白质治疗
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 634-641
• 页数: 8页
• 分类号: Q816
• 字数: 6353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2007.06.012

摘要

以SD大鼠脑组织RNA为模板,利用RT-PCR技术,将HIV-1反式激活蛋白(TAT)中具有蛋白质转导功能的9个氨基酸序列,即蛋白质转导域(PTD)基因与脑红蛋白(Ngb)基因融合,应用T-A克隆技术将融合基因与pMD19-T simple载体连接,经测序正确后克隆至表达载体pET28b中,转化感受态E.coli BL21(DE3)plysS,得到的转化子经IPTG诱导后获得可溶性表达,并经蛋白质印迹检测进一步鉴定.表达产物经Ni2+亲和纯化层析、脱盐后在原代培养的大鼠皮质神经元进行生物学活性检测,结果显示,TAT PTD-Ngb融合蛋白可以转运入皮质神经元内,在48h内可检测到其存在,并能提高缺氧条件下皮质神经元存活率、减少缺氧诱导的皮质神经元的凋亡.这一结果为进一步研究TAT PTD-Ngb的神经保护机制提供了线索,并可能为神经系统疾病尤其是脑血管疾病、神经系统退行性疾病提供一个新的治疗策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周盛年	山东大学齐鲁医院神经内科	92	626	12.0	21.0
2	胡学强	中山大学附属第三医院神经病学科	172	945	16.0	21.0
3	楼之茵	中山大学附属第三医院神经病学科	6	43	4.0	6.0
4	周国钰	中山大学附属第三医院神经病学科	6	34	3.0	5.0
5	朱灿胜	中山大学附属第三医院神经病学科	15	73	4.0	8.0