白桦AFLP体系的建立及优化

• 作者: 杨传平 连莲 魏志刚
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 白桦 AFLP 体系优化
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 页码范围: 1-4,9
• 页数: 5页
• 分类号: S791.259
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5382.2007.05.001

摘要

以不同白桦个体为材料,通过琼脂糖凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了DNA提取、双酶切、连接、预扩增和选择性扩增过程中的各影响因素,建立了扩增酶切片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism)分析体系,并用E2+M4引物对不同白桦个体进行了扩增,得出优化的关键因素分别为:模板DNA的质量浓度为0.094 g/L和0.086 g/L,符合AFLP分析中的双酶切要求;酶切反应时间为2 h 15 min;连接最适反应时间为2 h;预扩增PCR的退火温度设为60 ℃.银染结果表明:扩增信号强,无背景干扰,条带清晰.