甜菜夜蛾核多角体病毒(SeMNPV)ORF100和ORF101基因的克隆、表达与纯化

• 作者: 庞义 李朝飞 李玲玲
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 甜菜夜蛾核多角体病毒 ORF100 ORF101 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-24
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.96|S182
• 字数: 2999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.05.008

摘要

目的:构建甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)ORF100(Se100)和ORF101(Se101)基因的原核表达载体,表达并纯化两种蛋白.方法:用PCR方法扩增Se100和Se101基因,分别将它们克隆至原核表达载体pQE-30上,转化宿主菌M15[pREP-4],用IPTC进行诱导表达,表达产物用Ni-NTA金属螯合层析法进行纯化,SDS-PAGE检测表达的目的蛋白.结果:构建了分别含有Se100和Se101基因的原核表达质粒pQE100和pQE101;SDS-PAGE检测显示,表达的两个融合蛋白的分子量分别为15kDa和31kDa,比预期分子量稍大;Ni-NTA亲和层析结果显示:6×His-Se100和6×His-Se101融合蛋白主要存在于pH值为4.5的缓冲液中.结论:成功克隆并高效表达了Se100和Se101两个基因,有效纯化了两种蛋白,为深入进行基因的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李朝飞	中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室	16	88	6.0	9.0
2	庞义	中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室	96	1022	17.0	28.0
3	李玲玲	华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室	8	38	3.0	6.0