马白细胞介素-18单克隆抗体的制备及其特性的初步鉴定

• 作者: 刘光亮 吴东来 张维军 徐树兰 王群 白宇 童铁钢 肖一红
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 白细胞介素-18 马白细胞介素-18成熟蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 762-766
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.05.007

摘要

利用纯化的用原核系统表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白(pET-mEIL-18)抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,同时以昆虫杆状病毒表达系统获得的马白细胞介素-18成熟蛋白(mEIL-18)作为抗原进行间接ELISA检测,筛选并最终得到了9株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株.利用IFA试验对9株单克隆抗体进行鉴定,结果证实所获得的9株细胞分泌的抗体都是针对mEIL-18的特异性抗体.将此9株单克隆抗体分别与用原核系统分段表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白pET-mEIL-18-(1)(mEIL-18 1～78位氨基酸残基)和pET-mEIL-18-(2)(mEIL-18 79～157位氨基酸残基)蛋白进行特异性ELISA检测,结果表明,9株单克隆抗体有5株识别表达的pET-mEIL-18-(1)(mEIL-18 1～78位氨基酸残基),而另外4株单克隆抗体与pET-mEIL-18-(2)(mEIL-18 79～157位氨基酸残基)发生反应,说明所获得的9株单克隆抗体至少针对pET-mEIL-18 2个或2个以上不同的抗原表位.单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示,除M1F11、M3A11和N7D9为IgM,其余的单克隆抗体均为IgG1,而且所有单克隆抗体的轻链均为k链.