在大肠杆菌中表达有活性的人STK11蛋白

• 作者: 侯鑫 刘俊娥 扈廷茂
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: STK11蛋白 原核表达 Rosetta-gami(DE3)pLysS
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 79-82
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 3011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.01.017

摘要

STK11蛋白(serine/threonine kinase 11)是近年来发现的具有多种重要功能的蛋白,可参与调控细胞周期、p53介导的细胞凋亡、ras诱导的细胞转化、细胞极化等多种生物学过程.利用大肠杆菌高效表达有活性的人STK11蛋白,可为其结构和功能的深入研究打下良好基础.利用本室克隆的人STK11 cDNA和原核表达载体pET-44a(+)构建带有Nus融合标签的诱导型表达载体pET-Nus-STK11,在不同的大肠杆菌宿主中诱导表达.SDS-PAGE和Western blot检测表明,在BL21(DE3)宿主中表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的8.9%;在Rosetta-gami (DE3)pLysS宿主中主要表达为可溶性蛋白,占菌体总蛋白的16.7%.而经纯化和包涵体蛋白复性处理后,以Chariot介导重组融合蛋白进入人肝癌细胞SMMC-7721检测其对细胞生长和细胞周期的影响.与对照组相比,BL21(DE3)中表达的Nus-STK11蛋白几乎无抑制活性;而Rosetta-gami(DE3)pLysS中表达的Nus-STK11蛋白可以显著抑制SMMC-7721细胞的生长,抑制率达47.05%,并导致细胞周期的G0/G1期阻滞,证实表达的重组融合蛋白具有明显的生物学活性.上述结果为在大肠杆菌中成功表达有活性的重组STK11蛋白的首次报道.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	扈廷茂	内蒙古大学生命科学学院	49	330	10.0	16.0
2	侯鑫	内蒙古大学生命科学学院	19	289	8.0	16.0
3	刘俊娥	中国科学院微生物研究所	4	68	4.0	4.0