巴马小型猪SLA-2和β2m复合体蛋白的构建及二级结构测定分析

• 作者: 夏春 方勤美 李云岗 李新生 郝慧芳 高凤山
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 圆二色谱 SLA-2 β2m
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 263-270
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|S852.4
• 字数: 5669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.03.011

摘要

以巴马小型猪为研究材料,克隆SLA-2和β2m基因.然后采用剪接重叠延伸PCR(Splicing overlap extention PCR,SOE PCR)法,将SLA-2的胞外区和β2m的成熟肽部分通过一富含甘氨酸/丝氨酸的Linker(G4S)3连接,形成SLA-2-Linker-β2m.将SLA-2-Linker-β2m在pMAL-p2X系统上表达,其融合表达蛋白分别经过Western-blot、纯化及Factor Xa切割,分离纯化单体蛋白.圆二色谱(Circular dichroism spectrum,CD)测定蛋白的二级结构.结果显示,重构表达的复合体融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m大小为84.1 ku.切割后去除MBP的单体蛋白大小为41.6 ku.圆二色谱分析单体蛋白和融合蛋白二级结构元件α-螺旋、β-折叠、转角和随机卷曲的符合率分别达到了100%、97.3%、97.1%和97.9%,揭示重构的复合体具有正确的二级结构,可以用于体外多肽结合等研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李新生	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室	20	169	8.0	12.0
2	高凤山	大连大学生物工程学院	60	358	10.0	16.0
4	李云岗	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室	10	57	5.0	7.0
7	郝慧芳	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室	7	31	4.0	5.0
8	方勤美	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室	3	32	3.0	3.0