海洋哈维氏弧菌溶血素蛋白在酵母菌细胞表面上的展示及其活性的测定

• 作者: 吴龙飞 朱开玲 梁丽琨 池振明
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 溶血素 酵母表面展示 荧光染色 流式细胞术 活疫苗
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 资源环境技术
• 页码范围: 73-77
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 4439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2007.01.015

摘要

为制备以酒精酵母为载体的基因工程疫苗,参照其Genbank中基因序列设计一对引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后,用免疫荧光和流式细胞仪检测外源蛋白的表达,结果测得最佳诱导时间为36～48h,诱导培养后约30.0%左右的酵母细胞表达外源蛋白;同时以EBY100和转空质粒的酵母菌株为对照,测得诱导培养后的阳性酵母转化株的细胞对牙鲆鱼血细胞具有溶血活性,以此酵母活细胞分设高中低三个浓度组,腹腔注射养殖牙鲆幼鱼,检测其毒性,结果表明此重组酵母对牙鲆是安全的.该研究为下一步鱼用活载体疫苗免疫效果的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	池振明	中国海洋大学海洋生命学院	32	357	10.0	18.0
2	吴龙飞	中国海洋大学海洋生命学院	5	53	3.0	5.0
3	朱开玲	中国海洋大学海洋生命学院	4	72	4.0	4.0
4	梁丽琨	中国海洋大学海洋生命学院	2	31	2.0	2.0