粘虫中肠α-淀粉酶活性测定方法的参数优化

• 作者: 丰俊 刘扬 刘曼慧 孔玉萍 黄青春
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 粘虫 α-淀粉酶 参数优化 动力学常数
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 981-988
• 页数: 8页
• 分类号: Q966
• 字数: 6399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2007.10.002

摘要

针对粘虫Mythimna separata中肠α-淀粉酶筛选了11种不同参数组合的3,5-二硝基水杨酸活性测定方法,并对其中最适组合的各个参数进行了优化.结果表明:在离体测定条件下,粘虫中肠α-淀粉酶活性的最优化测定参数为0.03 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 8.0,含有55 mmol/L NaCl)、温度45℃、吸收波长480 nm.Ca2+对α-淀粉酶活性具有抑制作用.该优化法能够显著降低粘虫、德国小蠊Blattella germanica、黄粉虫Tenebrio molitor、淡色库蚊Culex pipiens pallens和家蝇Musca domestica等昆虫α-淀粉酶的米氏常数Km值,且粘虫和德国小蠊α-淀粉酶的Vmax值增大,但黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的Vmax值均明显减小.结果说明,在该优化体系下,粘虫α-淀粉酶与底物的亲和力增强,最大反应速度增大,测定酶活性的准确性和灵敏度显著提高;同时该优化体系也可作为测定德国小蠊α-淀粉酶活性的优化方法,但不适合作为黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的最优化测定方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄青春	华东理工大学药学院上海市化学生物学重点实验室	17	111	6.0	10.0
2	孔玉萍	华东理工大学药学院上海市化学生物学重点实验室	1	6	1.0	1.0
3	刘曼慧	华东理工大学药学院上海市化学生物学重点实验室	1	6	1.0	1.0
4	丰俊	华东理工大学药学院上海市化学生物学重点实验室	1	6	1.0	1.0
5	刘扬	华东理工大学药学院上海市化学生物学重点实验室	5	18	2.0	4.0