寻常型天疱疮抗原Dsg3基因的真核表达

• 作者: 吉耀华 孙峥嵘 徐媛媛 翟宁 耿龙 阮强 陈洪铎
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 天疱疮 重组抗原 Dsg3 EC1-EC5
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 552-554
• 页数: 3页
• 分类号: R75
• 字数: 3281字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2007.09.012

摘要

目的 探讨寻常型天疱疮自身抗原Dsg3 EC1-EC5在哺乳动物细胞的克隆、表达及纯化,并以重组的Dsg抗原检测寻常型天疱疮患者及正常人血清中的天疱疮抗体.方法 根据基因库中的Dsg3基因序列分析,采用RT-PCR法扩增自身抗原Dsg3 EC1-EC5多肽片段的cDNA,定向插入真核表达质粒pcDNA3.1TM/myc-His(-)B中,稳定转染人宫颈癌细胞系表达重组融合蛋白,并经Ni+亲和层析柱纯化.采用蛋白质印迹法鉴定蛋白表达产物.以重组Dsg3 EC1-EC5蛋白为抗原用ELISA检测40份寻常型天疱疮患者及40份正常人对照组血清.结果 成功构建真核表达重组体pcDNA3.1TM/myc-His(-)B-Dsg3.纯化的Dsg3 EC1-EC5蛋白能够与寻常型天疱疮患者血清中的天疱疮抗体发生反应.ELISA方法检测寻常型天疱疮患者血清,结果显示,天疱疮抗体的阳性率为95%.结论 真核表达的Dsg3 EC1-EC5蛋白与寻常型天疱疮患者血清中的抗体发生特异性反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洪铎	中国医科大学附属第一医院皮肤科	152	716	13.0	20.0
2	翟宁	中国医科大学附属第一医院皮肤科	48	140	6.0	7.0
3	耿龙	中国医科大学附属第一医院皮肤科	75	196	7.0	10.0
4	徐媛媛	中国医科大学附属第一医院皮肤科	14	59	4.0	7.0