深圳地区粉尘螨Ⅱ类变应原基因的多态性分析及其表达蛋白的变应原性鉴定

• 作者: 刘志刚 吉坤美 白羽 蔡成郁
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 粉尘螨 Der fⅡ 变应原 基因多态性 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 560-566
• 页数: 7页
• 分类号: Q966
• 字数: 4705字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2007.06.003

摘要

粉尘螨Ⅱ类变应原(Der fⅡ)是粉尘螨Dermatophagoides farinae主要变应原之一,可引发Ⅰ型变态反应.从深圳地区挑取活粉尘螨,经形态鉴定后纯培养,提取其总RNA,RT-PCR扩增出Der fⅡ基因,克隆到pMD18-T载体后测序.通过计算机软件分析该基因的多态性.将该目的基因克隆到pET-His表达载体上得到重组质粒pET-Der fⅡ.工程菌经IPTG诱导培养,表达Der fⅡ目的蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在.重组Der fⅡ蛋白通过6His-tag蛋白纯化系统进行分离、纯化,并进行Western blot检测该重组蛋白与对粉尘螨过敏患者血清中IgE的反应性.结果表明,克隆的5株深圳地区的Der fⅡ基因与GenBank公布的Der fⅡ(AB195580.1)核苷酸序列同源性为96.8%～99.3%,推导的氨基酸序列同源性为93.8%～98.6%.表达纯化的5种重组Der fⅡ蛋白经Western blot检测,表明都具有良好的变应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学生命科学学院	324	1724	17.0	23.0
2	吉坤美	深圳大学生命科学学院	32	237	10.0	13.0
3	白羽	深圳大学生命科学学院	6	43	5.0	6.0
4	蔡成郁	深圳大学生命科学学院	4	41	4.0	4.0