β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌中的整合诱导型表达

• 作者: 包晓兰 周平 武翠 王和平 蔺日胜 赵丽霞
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 酵母菌 25SrDNA 整合诱导型表达载体 表达 β-甘露聚糖酶
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3759字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.02.003

摘要

目的:实现β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌中的整合诱导型表达.方法:克隆猪肠道野生酵母菌JSY4的25S rDNA片段;并与VIP5经EcoRⅠ与BamH Ⅰ双酶切连接,构建载体YIP5-rDNA.BamHⅠ与Sal Ⅰ双酶切YIP5-rDNA,EcoR Ⅰ与Sal Ⅰ双酶切pGEM-Man Ⅰ得到Man Ⅰ基因,Bgl Ⅱ与EcoR Ⅰ双酶切pPIC9K得到AOX1启动子,将三个片段连接,构建高拷贝整合诱导型表达载体VIP5-rDNA-AOX1-Man Ⅰ.提取DNA用Sal Ⅰ单酶切线性化与pAX15按3∶1的比例共转化JSY4,在含300μg/ml G418的YEPD平板上筛选工程菌转化子,PCR方法鉴定.用2%甲醇诱导共转化工程菌以实现表达.结果:成功表达出β-甘露聚糖酶,其比活力为0.90IU/ml.而且传代10次后仍能检测到Man Ⅰ基因的表达产物β-甘露聚糖酶.结论:实现了β-甘露聚糖酶基因随共转化工程菌染色体稳定遗传及表达的目的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武翠	内蒙古农业大学生物工程学院	3	2	1.0	1.0
2	赵丽霞	内蒙古农业大学生物工程学院	28	78	5.0	7.0
3	王和平	内蒙古农业大学生物工程学院	14	55	3.0	6.0
4	周平	内蒙古农业大学生物工程学院	4	11	2.0	3.0
5	蔺日胜	内蒙古农业大学生物工程学院	4	8	2.0	2.0
6	包晓兰	内蒙古农业大学生物工程学院	2	5	2.0	2.0