菜豆几丁质酶基因的克隆、序列分析及其表达

• 作者: 曲敏 李新玲 王全伟
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 菜豆 几丁质酶基因 克隆 序列分析 表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 121-126
• 页数: 6页
• 分类号: S565.1
• 字数: 4100字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9841.2007.02.001

摘要

根据GenBank中收录的菜豆几丁质酶基因mRNA序列设计一对引物,以菜豆品种五常油豆总DNA为模板,通过PCR扩增获得一个约1.1kb的DNA片段Bchi,将其克隆入pUC18载体.测序和序列分析结果表明,该序列全长1088bp,含有一个981bp的完整开放读码框,无内含子,编码327个氨基酸,编码产物在结构上具有Class Ia几丁质酶的结构特征:N-端具有一个26个氨基酸的信号肽,其后是富含8个半胱氨酸、长41个氨基酸的几丁质结合区和由249个氨基酸组成的高度保守的催化区,C-端为由11个氨基酸组成的液泡定位多肽.序列与结构上的同源性分析表明Bchi基因是菜豆Class Ia几丁质酶基因.此序列已在GenBank中注册,登录号为AY357300.以pQE-30为原核表达载体,构建成pQE-Bchi重组表达载体,转化表达受体菌E.coliM15,经IPTG诱导后表达出一个约35kD的蛋白,与推测的Bchi基因编码产物的大小一致,表明Bchi基因在大肠杆菌中能够表达,是一个具有表达功能的基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李新玲	哈尔滨师范大学生命与环境科学学院	33	306	10.0	16.0
2	曲敏	哈尔滨商业大学食品工程学院生物系	42	425	10.0	20.0
6	王全伟	哈尔滨师范大学生命与环境科学学院	17	159	7.0	12.0