MDR1及MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌细胞对紫杉醇耐药的实验研究

• 作者: 任利容 卢实 卢美松 梁铭霖 王泽华 肖兰 高瑞
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 紫杉酚 基因,MDR RNA,小分子干扰 抗药性,肿瘤
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 412-416
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4435字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-567x.2007.06.014

摘要

目的 研究多药耐药基因--MDR1及MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞A2780/taxol对紫杉醇耐药的作用.方法 用真核质粒介导的针对MDR1及MDR3基因的短发夹状RNA(shRNA)转染A2780/taxol细胞(分别为MDR1组、MDR3组),空质粒转染作为对照(空载体组).流式细胞仪分别检测细胞早期凋亡、罗丹明123(Rh123)积聚情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)检测细胞晚期凋亡情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),RT-PCR技术检测MDR1及MDR3 mRNA的表达,蛋白印迹法(western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达.结果 转染后,MDR1组及MDR3组A2780/taxol细胞的早期凋亡率分别达(20.21±0.56)%和(10.87±1.24)%.MDR1、MDR3组A2780/taxol细胞内的Rh123平均荧光强度分别为116.6±8.1、98.4±3.8,显著高于空载体组的40.2±1.6,差异有统计学意义(P＜0.05).TUNEL检测显示细胞发生了晚期凋亡.MDR1、MDR3组A2780/taxol细胞对紫杉醇的IC50明显下降,分别与空载体组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).转染48 h后,A2780/taxol细胞中MDR1和MDR3 mRNA的表达水平分别下降了(73.3±0.8)%和(51.6±0.4)%;MDR1、MDR3组细胞caspase-3的表达量分别为(80.8±2.6)%、(72.0±4.7)%,均较空载体组增加.结论 MDR1及MDR3基因沉默能恢复A2780/taxol细胞对紫杉醇的敏感性并诱导细胞凋亡,从而逆转A2780/taxol细胞对紫杉醇的耐药性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王泽华	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	260	1294	18.0	23.0
2	卢美松	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	73	319	10.0	15.0
3	卢实	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	32	165	8.0	10.0
4	梁铭霖	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	11	74	5.0	8.0
5	肖兰	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	15	93	5.0	9.0
6	高瑞	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	7	22	3.0	4.0
7	任利容	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	7	33	4.0	5.0