一种简便的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法

• 作者: 周建嫦 房殿春 王自强 程永波 罗元辉 郭立萍
• 来源期刊: 胃肠病学
• 学科: 医学
• 关键词: 上皮细胞 胃黏膜 细胞培养技术
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-35
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4433字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-7125.2007.01.008

摘要

背景:原代培养的人正常胃黏膜上皮细胞与体内姊妹细胞相似,是进行胃生理和病理研究的理想工具,但我国尚未见简便、可靠的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法的报道.目的:探讨简便的人正常胃黏膜上皮细胞原代培养方法.方法:以胶原酶Ⅱ和分散酶磁性搅拌分离人正常胃黏膜上皮细胞.以甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测细胞活力,以观察细胞大体生长过程;以溴脱氧尿苷(BrdU)标记法检测S期细胞数量,以观察细胞微观增殖能力.以PAS染色鉴定胃黏膜上皮细胞黏原颗粒;以细胞角蛋白(CK)-18免疫荧光染色鉴定上皮细胞.以光学显微镜和透射电子显微镜观察细胞形态结构.初步观察传代细胞的贴壁生长情况.结果:培养第2～3 d,胃黏膜上皮细胞活力增幅最大,第4 d达最高点,之后逐渐下降;BrdU孵育18 h后,33.3%的细胞处于和曾经处于S期.接种密度高时,细胞PAS染色均呈紫红色,可见细胞核旁黏原颗粒;接种密度低时,仅成团细胞PAS染色呈阳性;培养第3 d,绝大部分细胞CK-18阳性.接种第2 d,胃黏膜上皮细胞成团簇状生长,增殖迅速,第4 d后逐渐停止生长,第5 d开始出现漂浮死亡细胞,最终完全被成纤维细胞取代;透射电子显微镜可见微绒毛、分泌颗粒、连接复合体等上皮细胞特征.传代胃黏膜上皮细胞增殖、铺展能力较原代细胞降低.结论:磁性搅拌酶分离培养可得到数量多、纯度高的人正常胃黏膜上皮细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	房殿春	第三军医大学西南医院消化内科	349	2116	20.0	30.0
2	罗元辉	第三军医大学西南医院消化内科	80	745	14.0	23.0
3	程永波	第三军医大学西南医院消化内科	13	51	4.0	6.0
4	王自强	第三军医大学西南医院普外科	33	308	9.0	16.0
5	周建嫦	第三军医大学西南医院消化内科	5	15	2.0	3.0
6	郭立萍	第三军医大学西南医院消化内科	1	7	1.0	1.0