丝状真菌DNA抽提方法的比较

• 作者: 娄永华 戴建新 朱红梅 温海
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 丝状真菌 DNA 抽提 氯化苄
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2007.01.005

摘要

目的 寻找一种针对产孢少的丝状真菌简单、有效的DNA抽提方法.方法 以红色毛癣菌和须癣毛癣菌为代表菌株,分别用改良后的氯化苄法及小量酵母DNA试剂盒(裂解酶+蛋白酶K)法抽提基因组DNA,并对所抽提DNA的质量及稳定性进行比较研究.结果 氯化苄法抽提的皮肤癣菌DNA片段均＞21 kb,每克菌丝体的DNA产量均＞25 μg.小量酵母基因组DNA试剂盒法抽提DNA,初步估测1.0×109/mL孢子菌丝混悬液的DNA得率仅约为0.6 μg.采用氯化苄法抽提保存3年的皮肤癣菌基因组DNA仍能很好地适用于聚合酶链反应(PCR)扩增.结论 采用氯化苄法抽提丝状真菌的DNA得率和纯度均较高,而且稳定性好,推荐用于产孢少、生长缓慢的丝状真菌DNA的抽提研究.