小干扰RNA对人乳头状瘤病毒6bE7基因表达的沉默作用

• 作者: 丁佳逸 叶俊 岑建萍 张行 朱可建 汤晓燕 程浩 陈萍 陈贤祯
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头状瘤病毒 6bE7 基因沉默 小干扰RNA 尖锐湿疣
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 213-217
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4208字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2007.03.004

摘要

目的 研究靶向人乳头状瘤病毒HPV-6b型E7基因的二聚体小干扰RNA(siRNA-HPV-6bE7)对靶基因表达的沉默作用.方法 建立并筛选稳定表达HPV-6bE7基因的B16和293T转染细胞株,用脂质体转染法将体外合成的siRNA-HPV-6bE7转染上述细胞株,采用实时荧光定量PCR分析靶基因HPV-6bE7的mRNA表达情况.结果 用不同浓度的siRNA-HPV-6bE7转染细胞48 h,50nmol/L浓度对B16细胞中靶基因表达的抑制作用最强(抑制率87.05%),1 nmol/L抑制作用较低(9.14%);而在293T细胞,10 nmol/L的siRNA对靶基因表达的抑制效应最大(78.87%),1 nmol/L仍有一定抑制作用(46.92%).50 nmol/L siRNA-HPV-6bE7转染B16细胞后,靶基因的mRNA表达在24 h内开始受抑制(32.47%),48 h作用最强(74.72%),96 h作用很低(8.91%);25 nmol/L和10 nmol/L的siRNA转染293T细胞后,均在24 h内起效(26.66%、20.31%),抑制作用至少能维持72 h(65.93%、35.23%).结论 siRNA-HPV-6bE7对B16和293T细胞外源性靶基因表达均有较强的特异性沉默作用,在不同细胞株达到最大抑制效应的siRNA浓度不同,但时效曲线的变化趋势基本一致,siRNA均在24 h内起效,48～72 h达到高峰,抑制作用至少能维持72 h.本研究结果为下一步在动物或临床进行siRNA干扰试验提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岑建萍	浙江大学附属邵逸夫医院皮肤科	12	40	4.0	6.0
2	朱可建	浙江大学附属邵逸夫医院皮肤科	38	148	7.0	10.0
3	程浩	浙江大学附属邵逸夫医院皮肤科	106	373	11.0	14.0
4	叶俊	浙江大学附属邵逸夫医院皮肤科	16	117	5.0	10.0
5	丁佳逸	浙江大学附属第二医院肿瘤研究所	12	83	4.0	9.0
6	汤晓燕	杭州市第三人民医院内科	4	11	2.0	3.0
7	陈贤祯	浙江大学附属邵逸夫医院皮肤科	9	35	3.0	5.0