青霉素结合蛋白2a C-末端在大肠杆菌M15中的表达、纯化及鉴定

• 作者: 丁国富 周红 和生琦 张蓉 李军 李斌 罗平 董燕 颜伟
• 来源期刊: 创伤外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 青霉素结合蛋白2a 大肠杆菌 mecA基因
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 创伤感染与免疫
• 页码范围: 28-31
• 页数: 4页
• 分类号: R967
• 字数: 3557字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4237.2007.01.008

摘要

目的 构建含目的基因mecA C末端的重组子并在大肠杆菌M15中进行蛋白表达.方法 采用PCR方法扩增mecA C末端DNA,将其与表达载体pQE30连接;再通过PCR及双酶切鉴定连接产物.将含目的基因片段的阳性重组质粒转化大肠杆菌M15后,用1mmol/L的IPTG进行诱导表达.应用Ni-NTA琼脂糖进行亲和层析纯化目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blotting对表达产物进行鉴定.结果 成功构建pQE30-mecA重组表达质粒,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,亲和层析纯化获得分子量为39.7 kDa的蛋白;Westem blotting和肽指纹图谱证实该蛋白为带有多聚组氨酸标签的融合蛋白.结论 在大肠杆菌内成功表达具有活性的PBP2a,为后期研究和开发抗MRSA药物奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周红	第三军医大学药理教研室	159	733	13.0	17.0
2	颜伟	第三军医大学药理教研室	66	702	14.0	23.0
3	李斌	第三军医大学药理教研室	92	553	11.0	18.0
4	罗平	第三军医大学药理教研室	40	155	8.0	9.0
5	董燕	第三军医大学药理教研室	12	33	3.0	5.0
6	李军	第三军医大学药理教研室	85	449	11.0	15.0
7	和生琦	第三军医大学药理教研室	4	12	2.0	3.0
8	张蓉	第三军医大学药理教研室	36	159	8.0	10.0
9	丁国富	第三军医大学药理教研室	17	52	5.0	5.0