一种新融合抗菌肽Hex-Mag基因的克隆、表达及其抗菌活性的研究

• 作者: 李桂平 陈仪本
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Hexapeptide(RRWQWR) Magainin1-12 重叠区扩增基因拼接法 融合肽Hex-Mag
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 115-120
• 页数: 6页
• 分类号: Q93
• 字数: 5711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.01.024

摘要

通过在Magainin1-12(GIGKFLHSAKKF)的N端添加碱性氨基酸片段Hexapeptide(RRWQWR)以增强其对细胞膜的吸附能力来提高Magainin1-12的抗菌活性.利用Hexapeptide和Magainin1-12的基因序列,结合酵母偏爱密码子设计出新的融合基因Hex-Mag,通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,gene SOEing)利用PCR扩增出基因片段,再将融合基因进行酶切并纯化后导入穿梭质粒pPIC9中,构建受乙醇氧化酶1基因(AOX1)的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化GS115毕赤酵母宿主菌,经表型筛选,阳性克隆用甲醇诱导表达.表达出的融合肽Hex-Mag分子量约2.3kDa,其耐热性强,在100℃条件下,其活性可维持3h以上.琼脂糖孔穴扩散法检测显示Hex-Mag对多种革兰氏阴性菌和阳性菌具有抑制活性,与Magainin1-12相比,其活性有明显增强,N端正电荷增加的预期效应得到初步体现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈仪本	广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室	76	1390	22.0	34.0
2	李桂平	中国科学院南海海洋研究所	7	231	7.0	7.0