shRNA沉默COX-2基因表达对人肝癌细胞生物学特性的影响

• 作者: 徐可树 汪步海 王华枫 钱伟
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 短发夹状RNA COX-2 肝肿瘤 粘附 侵袭
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 4747字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2007.01.006

摘要

背景与目的:环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在肝癌组织中呈高表达,参与肝癌的发生发展.本研究探讨COX-2短发夹状RNA(shrt hairpin RNA,shRNA)对人肝癌细胞株HepG2中COX-2表达及细胞粘附侵袭力的影响.方法:以人COX-2 mRNA编码区中两条不同序列作为RNA干扰靶点,分别构建两个以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的shRNA真核表达载体质粒WBH1和WBH2,应用阳离子脂质体转染HepG2细胞,分别观察转染后24 h、48 h、72 h和96 h COX-2 mRNA和蛋白表达的变化,检测抑制效果.MTT法观察HepG2细胞与Matrigel胶粘附性的变化.Transwell小室实验以穿过人工基底膜的细胞数量评估HepG2细胞体外侵袭力的变化.结果:质粒在HepG2细胞的转染率约为60%.质粒WBH1导人细胞24 h、48 h、72 h和96 h后,COX-2mRNA表达抑制率分别为18.5%、88.6%、52.8%和42.4%(P＜0.01),蛋白表达抑制率分别为10.3%、80.5%、45.3%和39.0%(P＜0.01).转染WBH2质粒的HepG2细胞COX-2表达无明显变化(P＞0.05).转染后48 h,转染WBH1质粒的HepG2细胞与Matrigel胶的粘附率为(6.0±0.4)%,与空白对照组(11.4±0.2)%相比明显下降(P＜0.01),抑制率为47.4%.转染WBH1质粒的细胞穿膜数为(8.2±1.5),与空白对照组(22.8±1.7)相比有显著性差异(P＜0.01),抑制率为63.7%.转染WBH2质粒的HepG2细胞粘附率和穿膜细胞数均无明显变化(P＞0.05).结论:shRNA真核表达载体明显干扰HepG2细胞的COX-2表达,能有效抑制HepG2细胞的体外粘附侵袭力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐可树	华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科	59	235	9.0	13.0
2	钱伟	华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科	120	672	13.0	18.0
3	汪步海	华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科	5	15	2.0	3.0
4	王华枫	华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科	3	7	1.0	2.0